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糞便RNA提取試劑盒

更新：2022/8/8 11:29:36

中文名：	糞便RNA提取試劑盒	說明書下載	暫無
英文名：	Stool RNA Kit
描述：	檢測糞便中病原菌等微生物、以及一些未消化食物樣品的RNA是現(xiàn)代診斷的重要手段。由于糞便中存在大量抑制因子，常規(guī)的RNA純化方式不能有效地去除這些雜質(zhì)，導(dǎo)致下游實驗的失敗，如PCR不能擴增出所需片段。Stool RNA Kit采用了簡便的硅膠柱純化方式和獨特的溶液系統(tǒng)，能有效去除動物糞便中各種影響下游實驗抑制因子，并能高效地回收糞便中的基因組DNA。一次可處理0.05-0.5g樣品，純化的DNA可直接用PCR等實驗。

訂購信息

貨號	規(guī)格	價格	品牌
D1305	50T	780	GBCBIO
D1306	100T	1380	GBCBIO
D1307	200T	2480	GBCBIO

產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品簡介

檢測糞便中病原菌等微生物、以及一些未消化食物樣品的RNA是現(xiàn)代診斷的重要手段。由于糞便中存在大量抑制因子，常規(guī)的RNA純化方式不能有效地去除這些雜質(zhì)，導(dǎo)致下游實驗的失敗，如PCR不能擴增出所需片段。Stool RNA Kit采用了簡便的硅膠柱純化方式和獨特的溶液系統(tǒng)，能有效去除動物糞便中各種影響下游實驗抑制因子，并能高效地回收糞便中的基因組DNA。一次可處理0.05-0.5g樣品，純化的DNA可直接用PCR等實驗。

試劑盒組成

產(chǎn)品編號	R1301	D1305	D1306	D1307
次數(shù)	5	50	100	200
純化柱子	5	50	100	200
收集管	5	50	100	200
Buffer RC1	4ml	30ml	60ml	120ml
Buffer RC2	1ml	6ml	12ml	24ml
Buffer RC3	1ml	6ml	12ml	24ml
Buffer RC4	1ml	10ml	16ml	35ml
Buffer RC5	1ml	20ml	37ml	65ml
Glass Beads	2ml	20g	40g	80g
Wash Buffer I	2g	30ml	55ml	110ml
Wash Buffer II	2	13ml	26ml	*26ml2**
說明書	1	1	1	1

儲存和穩(wěn)定性

室溫保存，一年有效。Buffer RC2與Buffer RC3可能有沉淀產(chǎn)生，37℃水浴溶解后即可。

實驗前準(zhǔn)備

請詳細(xì)閱讀該手冊并熟悉各個步驟，在開始之前準(zhǔn)備好所有的試劑盒組分和必需的器材。

試劑準(zhǔn)備：

縮的RNA Wash Buffer II 需用無水乙醇按如下稀釋：

R1301 加8 ml；R1305加入52 ml ；R1306與R1307每瓶加入104 ml 無水乙醇

Buffer RC1使用前加入終濃度為1%的巰基乙醇，如1ml Buffer RC1加入10μl巰基乙醇。

需自備器材

無水乙醇 1.5ml離心管水浴離心機

操作步驟

1. 稱0.3-0.5g糞便置于2ml離心管中，加入0.4g Glass Beads，再加入500μl Buffer RC1（注意加入5μl巰基乙醇） ，100μl Buffer RC2以及500μl水飽和酚（需自備）。渦旋器高速震蕩3-5min。

注意：對含水量豐富的樣品，可以預(yù)先離心除去部分水分后再稱去樣品。Buffer RC2是我司獨特的腐殖酸除去劑，100μl對大部分樣品來說足以有效除去腐殖酸等抑制因子。對一些腐殖酸含量特別豐富的土壤， Buffer RC2的量可以適當(dāng)增加，但不能超過250μl，否則會嚴(yán)重影響RNA的得率。

2. 加入200μl Buffer RC3（RC3如有沉淀37℃水浴完全溶解后再用），渦旋5-10分鐘。

3. 加入200μl氯仿渦旋。12000 rpm(~13000×g)離心5鐘，轉(zhuǎn)600μl上清到1.5ml離心管中，加入180μl Buffer RC4混勻。

注意：轉(zhuǎn)移上清時確保不要吸取到沉淀，轉(zhuǎn)移的上清量最好不超過80%。

4. 冰上放置5min。12000 rpm(~13000×g)離心5鐘。 轉(zhuǎn)移上清到新的1.5ml離心管中。

5. 加入二分之一上清體積的 Buffer RC5與與等體積的無水乙醇，充分混勻。如：向500μl 上清中加入250μl Buffer C3與500μl無水乙醇。

6. 把上述混勻的液體轉(zhuǎn)移到GBC分離柱上。10,000×g離心30秒以結(jié)合RNA，棄去濾出液體。

純化柱最大容量為750μl,如果混合液大于750μl,請分兩次過柱。

7. 向GBC吸附柱中加入500μl Wash Buffer I 離心30秒，棄廢液。

8. 向GBC吸附柱 中加入600μl Wash Buffer II，12,000 rpm (~13,400×g ) 離心30 秒，倒掉廢液，GBC吸附柱放入收集管中。

注意：Wash Buffer II使用前請先檢查是否已加入無水乙醇）

9.向GBC吸附柱 中加入600μl Wash Buffer II，12,000 rpm (~13,400×g ) 離心30秒，倒掉廢液，將GBC吸附柱放入收集管中。

10. 12,000 rpm(~13,400×g)離心1分鐘，倒掉廢液，以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。