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     Buffpro 300與Sigma公司的ProClin 300或陶氏化學(xué)(Dow Chemical Company)的PROCLIN 300屬于同類產(chǎn)品，效果一致；是一種廣譜、高效、穩(wěn)定、低毒的抑菌劑(antimicrobial, microbicide)和防腐劑(preservative)，可用于一抗、二抗、封閉液、抗體稀釋液、洗滌液、生化緩沖液、水浴鍋用水、清洗劑、化妝品等的抑菌防腐。

      Buffpro 300主要活性成分是5-氯-2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(5-chloro-2-methyl-4-isothiazolin-3-one, CMIT)和2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(2-methyl-4-isothiazloin-3-one, MIT)的3:1混合物。這兩種成分可以抑制微生物生長(zhǎng)并促使微生物死亡。其原理是，CMIT/MIT與細(xì)胞膜接觸后，可立即滲透到細(xì)胞膜內(nèi)并抑制細(xì)胞代謝的關(guān)鍵環(huán)節(jié)三羧酸循環(huán)(tricarboxylic acid cycle)過(guò)程中的α-酮戊二酸脫氫酶(ketoglutarate dehydrogenase)、琥珀酸脫氫酶(succinate dehydrogenase)和NADH脫氫酶(NADH dehydrogenase)的活性，同時(shí)，其它的一些重要的酶如丙酮酸脫氫酶(pyruvate dehydrogenase)、乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase)、乙醇脫氫酶(alcohol dehydrogenase)也可以被抑制，從而抑制細(xì)胞代謝及大分子的合成，引起細(xì)胞內(nèi)能量水平迅速下降，最終由于能量體系的崩潰、細(xì)胞不能進(jìn)行正常的合成代謝而生長(zhǎng)抑制或死亡。細(xì)菌和真菌擁有全部或部分三羧酸循環(huán)，因此本產(chǎn)品對(duì)細(xì)菌和真菌都適用，具有非常廣譜的抗菌譜，而且本產(chǎn)品具有多個(gè)脫氫酶作用位點(diǎn)，因此大大降低了因變異而產(chǎn)生的微生物的耐藥性。

      本產(chǎn)品高效、穩(wěn)定、低毒、環(huán)保。本產(chǎn)品起效時(shí)間快，適用pH范圍廣(pH2.5~8.5)，在各種緩沖溶液如Tris、TES或HEPES等pH7左右的溶液中化學(xué)穩(wěn)定性好；在推薦溫度下，未開(kāi)封產(chǎn)品可以穩(wěn)定保存三年以上；與水可以任意比混合，適用于在水性溶液中添加本產(chǎn)品，在水溶液中的穩(wěn)定性好，對(duì)試劑的顏色無(wú)干擾；本產(chǎn)品毒性遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于硫柳汞和疊氮化鈉，且有良好的生物降解能力，不會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染。

Buffpro系列產(chǎn)品的主要特點(diǎn)和差異如下：

1. Buffpro系列抑菌劑對(duì)酶活性的影響

1.1對(duì)辣根過(guò)氧化物酶(HRP）活性的影響
      向0.2ml的PCR管中加入100ul GBCBIO公司的TMB顯色液（貨號(hào)G4308），再加入終濃度為0%、0.05%與0.5%的Buffpro 150、Buffpro 300、Buffpro 950，最后加入同樣濃度的HRP標(biāo)記的二抗，顯色同樣的時(shí)間后加入100ul 顯色終止液（貨號(hào)G1108）測(cè)定450nn吸光值，顯示高至0.5%的Buffpro系列抑菌劑對(duì)HRP活性物影響。

1.2 對(duì)聚合酶（Taq）活性的影響
向qPCR反應(yīng)體系中加入終濃度為0%、0.05%與0.5%的Buffpro系列抑菌劑，實(shí)驗(yàn)顯示高至0.5%的Buffpro系列抑菌劑對(duì)PCR無(wú)明顯影響。

2.1. 對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制效果（細(xì)菌）

培養(yǎng)基高壓滅菌后，冷卻并添加一定量的Buffpro 300后到平板。凝固后接種同樣菌量的金黃色葡萄球菌，37℃培養(yǎng)18h。結(jié)果如下圖：

編號(hào)  Buffpro 300（V/V）  結(jié)果   J0 0  不可計(jì)數(shù)   J1 0.01% 未檢出   J2 0.02%   未檢出   J3 0.05%  未檢出

2.2.  對(duì)白色念珠菌的抑制效果（真菌）

培養(yǎng)基高壓滅菌后，冷卻并添加一定量的Buffpro 300后到平板。凝固后接種同樣菌量的白色念珠菌，37℃培養(yǎng)18h。結(jié)果如下圖：

編號(hào)  Buffpro 300（V/V）  結(jié)果   N0 0  不可計(jì)數(shù)   N1 0.01% 未檢出   N2 0.02%  未檢出   N3 0.05%  未檢出

2.3. 對(duì)黑曲霉的抑制效果（霉菌）

培養(yǎng)基高壓滅菌后，冷卻并添加一定量的Buffpro 300后到平板。凝固后接種同樣菌量的霉菌，37℃培養(yǎng)18h。結(jié)果如下圖：

編號(hào)  Buffpro 300（V/V）  結(jié)果    H0 0  不可計(jì)數(shù)    H1 0.01% 未檢出    H2 0.02%  未檢出    H3 0.05%  未檢出

2.4. 結(jié)論

通過(guò)對(duì)典型菌種的抑制培養(yǎng)，顯示低至0.01%Buffpro 300能夠?qū)��?xì)菌、真菌與霉菌有效抑制。