MTT細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒
更新：2017/3/21 16:54:20
| 中文名： | MTT細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒 | 說(shuō)明書(shū)下載 | 下載 |
| 英文名： | Cell Proliferation Kit(MTT) | ||
| 描述： | MTT細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒(Cell Proliferation Kit)被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測(cè), 其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚（Formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無(wú)此功能。在特定溶劑存在的情況下，F(xiàn)ormazan可以被完全溶解。然后通過(guò)酶標(biāo)儀可以測(cè)定570nm波長(zhǎng)附 近的吸光度。細(xì)胞增殖越多越快，則吸光度越高；細(xì)胞毒性越大，則吸光度越低。 本試劑盒采用了獨(dú)特的Formazan溶解液配方，無(wú)需去除原有的培養(yǎng)液，直接加入溶解液溶解formazan。從而避免了由于去除培養(yǎng)液時(shí)formazan被部分去除而引起的誤差。 | ||
| 貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格 | 品牌 |
| G7420-2 | 200T | 120 | GBCBIO |
| G7420-5 | 500T | 210 | GBCBIO |
| G7420-25 | 2500T | 877 | GBCBIO |
產(chǎn)品特點(diǎn)： 本底低，靈敏度高，線性范圍寬，使用方便 儲(chǔ)存和穩(wěn)定性: MTT避光保存，一年有效，成溶液后需-20℃避光保存。Formazan溶解液也可以室溫保存。 試劑盒組成:
注意事項(xiàng)： Formazan溶解液結(jié)凍或產(chǎn)生沉淀時(shí)可以37℃水浴孵育以促進(jìn)溶解，并且必 須在全部溶解并混勻后使用。 MTT溶劑在低溫情況下會(huì)凝固，使用前請(qǐng)室溫放置或20-25℃水浴溫育片刻 至全部融解后使用。 MTT配制成溶液后為黃色，需避光保存，長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí)，請(qǐng)勿使用。MTT溶液在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解 后使用。
使用說(shuō)明： 1. MTT溶液的配制：用MTT溶劑溶解MTT，配制成5mg/ml的MTT溶液。配制后即可使用，或直接-20℃避光保存，也可以根據(jù)需要適當(dāng)分裝后-20℃避光保存。 2. 通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100μl 2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100μl 5000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。按照實(shí)驗(yàn)需要，進(jìn)行培養(yǎng)并給予0-10μl特定的藥物刺激。 3. 每孔加入10μl MTT溶液，在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育4小時(shí)。 4. 每孔加入100μl Formanzan溶解液，在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)再繼續(xù)孵育。直至在普通光學(xué)顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)formazan全部溶解。通常37℃孵育4小時(shí)左右，紫色結(jié)晶會(huì)全部溶解。如果紫色結(jié)晶較小較少，溶解的時(shí)間會(huì)短一些。如果紫色結(jié)晶較大較多，溶解的時(shí)間會(huì)長(zhǎng)一些。 5. 在570nm測(cè)定吸光度。如無(wú)570nm濾光片，可以使用560-600nm的濾光片。 |