用從小于250ml培養(yǎng)過(guò)夜的細(xì)菌培養(yǎng)液純化高達(dá)500μg質(zhì)粒DNA
質(zhì)粒大量試劑盒(Relax-ISO Plasmid Maxi Kit)是一種簡(jiǎn)單方便的提取和純化質(zhì)粒的產(chǎn)品。能方便、快速純化出高至500μg高純度質(zhì)粒DNA,純化過(guò)程不需用到昂貴的設(shè)備。質(zhì)粒的產(chǎn)量依賴于質(zhì)粒的拷貝數(shù)、E.coli的菌株以及生長(zhǎng)條件,一般150-250ml高拷貝LB過(guò)夜培養(yǎng)菌液可以純化出250-500μg質(zhì)粒DNA。
從150-250ml培養(yǎng)過(guò)夜的菌液中收集細(xì)菌后,采用傳統(tǒng)的SDS堿裂解法裂解細(xì)菌,離心去除染色體DNA和蛋白質(zhì),上清液異丙醇沉淀質(zhì)粒DNA后,經(jīng)過(guò)兩種溶液洗滌去除蛋白質(zhì)和各種雜質(zhì)后,最后用滅菌水或TE洗脫出質(zhì)粒DNA。
用途
從250-400ml培養(yǎng)過(guò)夜的細(xì)菌培養(yǎng)液純化出高達(dá)500μg高純度的質(zhì)粒
純化的質(zhì)?芍苯佑糜谧詣(dòng)測(cè)序、酶切、標(biāo)記等常規(guī)實(shí)驗(yàn).
實(shí)驗(yàn)實(shí)例

質(zhì)粒電泳圖
250ml菌經(jīng)質(zhì)粒大提試劑盒提取質(zhì)量后,1.2ml洗脫,取2μl電泳分析.
可適用的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
1.測(cè)序
2.限制性酶切
3.連接與轉(zhuǎn)化
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