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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

臺(tái)盼藍(lán)(Trypan blue)又稱錐藍(lán)或錐蟲(chóng)藍(lán)等，不能透過(guò)活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜，故活細(xì)胞不著色，即產(chǎn)生所謂的拒染現(xiàn)象,而死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性增加，可使染料通過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，使死細(xì)胞著色呈藍(lán)色，是常用的檢測(cè)細(xì)胞活率的方法。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡，這與中性紅作用相反。因此，借助臺(tái)盼藍(lán)染色可以非常簡(jiǎn)便、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。臺(tái)盼藍(lán)是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。

Trypan blue stain(0.4%)常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性以及細(xì)胞是否存活�；罴�(xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色，而死細(xì)胞會(huì)被染成淡藍(lán)色。臺(tái)盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬，故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。臺(tái)盼藍(lán)染色后，通過(guò)顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù)，就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量，0.4%為常用的濃度。

注意事項(xiàng)：

l          Trypan blue stain對(duì)人體有輕微毒性，請(qǐng)注意小心防護(hù)。

l          注意凋亡小體偶爾也有臺(tái)盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。

l          為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

儲(chǔ)存和穩(wěn)定性

4℃室溫保存，一年有效。4shi4，至少一年有效。

試劑組成

使用說(shuō)明：

1. 收集細(xì)胞：

    對(duì)于貼壁細(xì)胞先用胰酶和/或EDTA消化下細(xì)胞。對(duì)于懸浮細(xì)胞，則可以直接收集細(xì)胞。把收集的細(xì)胞在1000-2000g離心1分鐘，棄上清，用1毫升或根據(jù)細(xì)胞的量用適當(dāng)PBS重新懸起細(xì)胞。將待染色細(xì)胞用PBS稀釋至所需濃度（方法及濃度范圍與細(xì)胞計(jì)數(shù)相同）。

2. 臺(tái)盼藍(lán)染色：

    細(xì)胞懸液與0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液以9:1比例混勻（終濃度0.04%），染色3分鐘(染色3分鐘時(shí)間已經(jīng)足夠，染色時(shí)間可以更長(zhǎng)一些，但不宜超過(guò)10分鐘)。例如：180μl細(xì)胞懸液，加入20μl  0.4% Trypan Blue Solution染色液，混勻染色3分鐘。

3. 計(jì)數(shù)：

    吸取少量經(jīng)過(guò)染色的細(xì)胞，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。通常如果要比較精確地進(jìn)行定量，每個(gè)細(xì)胞樣品至少數(shù)500個(gè)細(xì)胞，數(shù)出藍(lán)色細(xì)胞和細(xì)胞總數(shù)。